|
Клиническая лабораторная диагностика: методы исследования стр.9
В настоящее время используются главным образом циангемогло-биновые методы, в которых лучше всего сочетаются точность и техническая простота.
Газометрические методы и методы, основанные на определении железа точны, но требуют много времени и поэтому не нашли широкого практического применения.
Определение количества гемоглобина в крови циангемоглобиновым методом
Унифицированный метод определения гемоглобина, наиболее широко применяемый в клинических лабораториях Украины.
 1. Принцип метода.
Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием окисляется в метгемоглобин, образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемоглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.
2. Реактивы:
а) трансформирующий раствор, содержащий ацетонциангидрин (0,5 мл), калий железосинеродистый (200 мг), бикарбонат натрия (1 г), дистиллированную воду (до 1000 мл). При появлении мути раствор не пригоден к употреблению;
б) стандартный раствор гемоглобинцианида — 5 мл. Концентрация гемоглобинцианида — 150 г/л.
3. Приготовление трансформирующего раствора.
В мерную колбу на 1000 мл внести приблизительно 500 мл дистиллированной воды, количественно прибавить содержимое флакона смеси реактивов и содержимое 1 ампулы ацетонциангидрина, перемешать и дополнить дистиллированной водой до метки, перемешать и перелить в посуду для хранения.
Хранить в прохладном, темном месте.
4. Ход определения.
20 мкл крови прибавляют к 5 мл трансформирующего раствора, хорошо перемешивают, оставляют стоять 20 мин, после чего измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против трансформирующего раствора или дистиллированной воды.
Стандартный раствор колориметрируют без обработки.
5. Расчет.
Р пр,
СТ
где 150 — концентрация гемоглобинцианида;
Ест — экстинкция стандартного раствора;
Еп — экстинкция пробы. Результат выражается в г/л.
 Определение количества гемоглобина в крови колориметрическим методом
Для ориентировочного определения гемоглобина крови иногда используют гемометр Сали (рис. 1)*. Метод основан на сравнении интенсивности окраски исследуемого раствора с интенсивностью окраски стандартного раствора. Гемоглобин крови под действием соляной кислоты превращается в солянокислый гематин, окрашивающий раствор в коричневый цвет. Полученный раствор колориметрируют:
Предыдущая Следующая
|
