С 1960 г. начинается бурное развитие клинической цитогенети-ки: в 1959 г. Дж.Лежен открыл хромосомную природу синдрома Дауна; К. Форд, П.Джекобе и Дж.Стронг описали особенности кариотипа при синдромах Клайнфельтера и Тернера; в начале 70-х гг. была открыта хромосомная природа синдромов Эдвардса, Патау, синдрома «кошачьего крика»; описана хромосомная нестабильность при ряде наследственных синдромов и злокачественных заболеваниях.

С 1960 г. начинается бурное развитие клинической цитогенети-ки: в 1959 г. Дж.Лежен открыл хромосомную природу синдрома Дауна; К. Форд, П.Джекобе и Дж.Стронг описали особенности кариотипа при синдромах Клайнфельтера и Тернера; в начале 70-х гг. была открыта хромосомная природа синдромов Эдвардса, Патау, синдрома «кошачьего крика»; описана хромосомная нестабильность при ряде наследственных синдромов и злокачественных заболеваниях.

Вместе с тем применение метода получения равномерно окрашенных хромосом оказалось недостаточно эффективным для идентификации хромосом.

В начале 70-х гг. были разработаны методы дифференциальной окраски хромосом, которые позволяли однозначно идентифицировать каждую хромосому. Методы были основаны на способности

некоторых красителей специфически связываться с конкретными участками хромосом в зависимости от их структурно-функциональной организации. Предложенные методы выявляли линейную неоднородность (сегменты) хромосом На практике наибольшее применение получили методы дифференциальной окраски красите-

Асанов А. Ю. и др.

лем Гимза (в-окраска) и флюоресцирующим красителем акрихином или акрихинипритом (О-окраска).

На рис. III. 5 представлены хромосомы человека при в-окраске Хорошо видно, что каждая хромосома человека имеет только ей

Асанов А. Ю. и др.

Рис III 4 Хромосомный набор женщины

Асанов А. Ю. и др.

Рис. Ш.5. Схематическое изображение дифференциальной окраски хромосом человека по в-методу

Асанов А. Ю. и др.

X Y

Рис. III.6. Структура Х- и Y-хромосомы человека при дифференциальной окраске с тремя уровнями разрешения:

Слева — примерно 400 полос на гаплоидный набор, в центре — примерно 550,

справа — 850 полос

свойственную последовательность разношироких полос. Это позволяет точно идентифицировать любую из хромосом и обнаруживать относительно крупные изменения в их структуре. При анализе ме-тафазных хромосом средней конденсации можно четко различить около 350 — 400 относительно крупных сегментов на гаплоидный набор. На стадиях, предшествующих метафазе, хромосомы менее спирализованы и поэтому имеют большую поперечную подразде-ленность. Были разработаны методы анализа хромосом на делящихся клетках в стадии прометафазы. Использование этого методического подхода позволило получить хромосомы с разной степенью сегментации — от 800 до 2500 сегментов на гаплоидный набор. На рис. III.6 представлены дифференциально окрашенные X и Y-хромосомы с различными уровнями спирализации. Исполь-


Предыдущая Следующая