 |
Клиническая оценка лабораторных тестов стр.14
Иммунодиффузия — один из методов иммунологического анализа антигенов и антител, основанный на реакции преципитации. В результате реакции между антигенами и антителами, поступающими-в гель путем диффузии, в зоне оптимального их соотношения образуются полосы преципитации, легко выявляемые визуально или окрашиванием на белки. Особенностью метода является то, что;, каждая пара антиген — антитело формирует свою полосу, и реакция не зависит от наличия в системе других антигенов и антител. Местоположение полос преципитации определяется скоростью диффузии антигенов и антител и их концентрацией в исходных растворах.
Иммунопреципитация автоматизированная — метод, основанный; на классической реакции преципитации между антигеном и соответствующим антителом. В результате преципитации происходит помутнение раствора, интенсивность флюоресценции которого под действием света определенной длины волны пропорциональна концентрации определяемого антигена. Все этапы реакции автоматизированы и выполняются на автоматических анализаторах поточного принципа действия.
Иммуноферментный анализ (ИФА)—вид иммунохимического анализа, основанный на иммунологической реакции антигена с соответствующим антителом с образованием комплекса антиген—антитело, для выявления которого в качестве метки (маркера) антигена, антитела или обоих компонентов этой реакции используют их конъюгаты с ферментами. ИФА, в котором необходимо разделение-свободных и связанных с ферментом молекул, называется гетерогенным (см. «Ферментсвязывающий иммуносорбентный анализ»). В гомогенном ИФА поведение конъюгатов, меченных ферментом, целиком определяется реакцией антиген — антитело, и разделения свободных и связанных меченых молекул не требуется. Гомогенный ИФА—EMIT (enzyme multiplied immunoassay technique)—используется главным образом для определения гаптенов.. Определенный гаптен ковалентно связывается с молекулой фермента вблизи актив-
1Т"
ного центра. При специфическом связывании образовавшегося комплекса с антителами против гаптена происходит ингибирование каталитической активности фермента. В другом случае ингибированный в конъюгате с гаптеном фермент вновь активируется при связывании конъюгата со специфическими к гаптену антителами. Количественные измерения веществ в ИФА основаны на определении активности ферментов (после добавления в иммунохимическую систему специфических для данных ферментов субстратов) колориметрическими методами или путем измерения теплового эффекта ферментативной реакции. Предыдущая Следующая
|
 |